事實上,C 調 do 的頻率為多少,亦要看我們以甚麼音階 (Musical scale) 為標準而定。以下我們介紹兩種音階,它們分別是 "Scientific scale" 和 "Musician's scale",而後者亦稱為 "Equitempered scale"。
在 Scientifc scale 裡,C 調 do (懂得看樂譜的人通常稱它為 C 音) 的頻率為 256 Hz,而 do' (高 C 音) 的頻率為 do 的兩倍,即 512 Hz。C 調 la (或稱為 A 音) 的頻率為 do 音的 5/3 倍,即 426.7 Hz。
Musician's scale 跟 Scientific scale 稍有不同。它把 C 調 la 的頻率定義為 440 Hz。C 調 do' (高 C 音) 的頻率是 la 的 23/12 倍,等於 523.25 Hz。do 的頻率為 do' 的一半,等於 261.63 Hz。
雖然兩種音階有少許差別,但無論在那一種音階裡,兩個相差八度的音符,高八度音的頻率都是較低頻率的兩倍。